Antígenos Cmv
El CMV pertenece a la subfamilia Betaherpesvirinae de Herpesviridae, que incluye los virus del herpes simple 1 y 2, el virus de la varicela-zóster y el Epstein-Barrvirus. Los herpesvirus comparten una capacidad característica de permanecer latentes durante largos periodos. El CMV es un virus de ADN lineal de doble cadena con 162 capsómeros proteicos hexagonales rodeados por una membrana lipídica. El CMV tiene el mayor genoma de los virus del herpes, que oscila entre 230 y 240 kilobases. El CMV humano está compuesto por repeticiones únicas e invertidas que incluyen la existencia de 4 isómeros del genoma causados por la inversión de los componentes del genoma L-S (clase E). La replicación puede dividirse en expresión génica temprana inmediata, temprana retardada y tardía en función del tiempo de síntesis tras la infección. El ADN se replica por círculos rodantes. In vitro, el CMV se replica en los fibroblastos humanos.
Secuencia Cmv pp65
La identificación de los epítopos CTL derivados del CMV es valiosa para el seguimiento de la inmunidad antiviral y para la generación ex vivo de CTLs antivirales para su posible aplicación en la inmunoterapia adaptativa (10). La proteína de la matriz inferior 65 (pp65), una proteína estructural que es abundante a lo largo de la infección por CMV, es un tema importante de la investigación del CMV. Está ampliamente aceptada como el objetivo inmunológico dominante de la respuesta de las células T CD8+ contra el CMV (11). El análisis de la especificidad fina de los CTL específicos de la pp65 mostró que algunos donantes tienen una respuesta muy focalizada que reconoce un solo péptido, mientras que otros reconocen múltiples péptidos en todo el producto génico de la pp65 (12). Sin embargo, los epítopos CTL previamente identificados derivados de la proteína pp65 se limitaban a los alotipos HLA de clase I tradicionalmente bien estudiados, como el HLA-B*07 (13). Por lo tanto, se sabe relativamente poco sobre los epítopos que se presentan en alotipos observados con poca frecuencia (14).
El alto nivel de polimorfismo dentro de la región HLA puede proporcionar una ventaja en la defensa del huésped contra el patógeno mediada por las células T (15). Entre los epítopos presentados por los alotipos HLA, ciertos péptidos conocidos por su inmunodominancia son reconocidos con mayor frecuencia que otros, lo que se sugiere que está relacionado con repertorios de unión a péptidos de diferentes tamaños, afinidades e inmunogenicidades (16, 17). La inmunodominancia según los alotipos HLA se utiliza de forma variable para describir la respuesta más frecuentemente detectable entre los individuos analizados o la respuesta más fuerte dentro de un mismo individuo. Aunque se han estudiado los factores que afectan a la inmunodominancia, la inmunodominancia de los alotipos HLA frente al CMV sigue sin explorarse.
Proteína Pp65
El citomegalovirus (CMV), el patógeno viral oportunista más común en pacientes con SIDA y trasplante de médula ósea y otros órganos, causa una morbilidad y mortalidad significativas. Los estudios realizados antes y después de la introducción del tratamiento antirretroviral de gran actividad (TARGA) han identificado sistemáticamente la viremia del CMV como un factor predictivo de la mortalidad, independientemente del recuento absoluto de células T CD4 y de la carga viral del VIH. Las manifestaciones clínicas de la enfermedad por CMV están relacionadas con la localización de la lesión e incluyen retinitis, problemas en el tracto gastrointestinal, hepatitis, neumonía, miocarditis y alteraciones en el sistema nervioso central y periférico (1-4). El diagnóstico de la infección activa por CMV en pacientes inmunodeprimidos se ve dificultado por el hecho de que a menudo están infectados sin ningún síntoma clínico. Los métodos de detección rápida de la viremia por CMV incluyen: el ensayo de antigenemia para detectar el antígeno PP65 en leucocitos polimorfonucleares de sangre periférica, la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la amplificación basada en la secuencia de ácidos nucleicos (NASBA) y métodos moleculares como el ensayo de amplificación de la señal de ADN ramificado (ADNb) y la captura híbrida.
Prueba de antigenemia Cmv pp65
La infección por CMV en un ser humano sano suele ser subclínica. Sin embargo, en el huésped inmunodeprimido y en un feto en desarrollo puede dar lugar a una enfermedad localizada o diseminada. Las manifestaciones clínicas de la enfermedad por CMV incluyen neumonía, retinitis, hepatitis, enteritis y enfermedad neurológica. A pesar de la mejora de las modalidades de tratamiento, la infección por CMV puede provocar una morbilidad y una mortalidad significativas. Los pacientes corren el riesgo tanto de sufrir una infección primaria por CMV como de reactivar una infección latente.
El ensayo de antigenemia por CMV pp65 es una herramienta valiosa en el diagnóstico y seguimiento de la infección activa por CMV en pacientes con trasplante de órganos sólidos y de médula ósea, así como en el diagnóstico y seguimiento de la enfermedad por CMV en pacientes con SIDA. El diagnóstico temprano y rápido de la infección activa por CMV es de gran importancia para evitar el sobretratamiento con fármacos inmunosupresores y para guiar la terapia antiviral.
El kit de antigenemia CMV Brite™ Turbo utiliza el cóctel de anticuerpos C10/C11 bien definido para detectar la fosfoproteína de la matriz inferior del CMV (pp65), un antígeno temprano en la replicación del virus, que está abundantemente presente en las células polimorfonucleares positivas al antígeno. El CMV Brite™ Turbo Kit, es una nueva versión rápida del primer kit de antigenemia por inmunofluorescencia registrado por la FDA para el diagnóstico in vitro del CMV.
